1. Què inclouen els estudis no clínics?
Resposta:Els experiments no clínics inclouen estudis de farmacologia, proves de toxicitat general, experiments de toxicocinètica i farmacocinètica no clínica, proves de toxicitat reproductiva, proves de genotoxicitat, carcinogenicitat i altres proves (fototoxicitat, dependència, immunotoxicitat), etc. Per a una certa proporció elevada (més del 10% de l'exposició sistèmica total i el nivell d'exposició en estudis amb animals és inferior a l'exposició humana), pot ser necessari realitzar estudis de seguretat no clínics dels metabòlits.
2. Quin és l'objectiu de l'avaluació de la seguretat no clínica?
Resposta:El propòsit de l'avaluació de la seguretat no clínica generalment inclou dilucidar les característiques de la reacció de toxicitat relacionades amb els òrgans diana, la dependència de la dosi, la relació d'exposició i la possible reversibilitat. Aquesta informació es pot utilitzar per estimar la dosi inicial segura i l'interval de dosis per a assaigs clínics humans (com s'ha esmentat anteriorment, cal obtenir NOAEL en experiments de toxicologia per calcular MRSD, la dosi inicial màxima recomanada) i per determinar indicadors de seguiment clínic de possibles reaccions adverses.
3. Quins estudis no clínics són necessaris per als primers-assaigs-en humans?
Resposta:Per a aquesta pregunta, primer cal aclarir el tipus de fàrmac. ICH M3 (R2) és aplicable a situacions habituals en el desenvolupament de fàrmacs i proporciona principis d'orientació generals. Per als productes biològics, els estudis no clínics s'han de dur a terme segons els requisits de l'ICH S6.
⑴Farmacocinètica:Abans de la presentació de l'IND, són suficients les dades sobre el metabolisme del producte en investigació en diferents espècies i les dades de metabolisme in vitro en humans, així com la taxa d'unió a proteïnes plasmàtiques. La informació sobre l'absorció, la distribució, el metabolisme in vivo i l'excreció s'ha de completar abans dels-assaigs clínics a gran escala (normalment la fase 3). Els experiments d'absorció de PK generalment es realitzen en diverses espècies abans de la presentació de l'IND i la determinació de PCC per entendre millor les característiques PK del fàrmac en diferents espècies, tot i que aquí no es requereix, cosa que és una mica estranya.
⑵Farmacologia de seguretat:L'avaluació dels efectes sobre els sistemes cardiovascular, nerviós central i respiratori s'ha de completar abans de la presentació de l'IND, que és una combinació de proves estàndard de farmacologia de seguretat. Es poden dur a terme experiments farmacològics de seguretat suplementaris durant els assaigs clínics si cal.
⑶Toxicitat de dosis repetides:En general, s'organitza una prova de toxicitat crònica-a curt termini en funció de l'esquema de dosificació primerenca d'IND. Si el període de dosificació s'ha d'allargar més tard, cal fer una prova de toxicitat crònica a llarg termini-per donar-hi suport.
⑷Genotoxicitat:Amb un cost relativament baix, la combinació de proves de genotoxicitat es pot completar abans de la presentació de l'IND.
⑸Carcinogenicitat:Les proves de carcinogenicitat s'han de completar abans de l'aprovació del fàrmac.
⑹Toxicitat per a la reproducció:Les observacions i avaluacions del sistema reproductor s'han d'incloure en les proves de toxicitat de dosis repetides abans de la presentació de l'IND per avaluar preliminarment la toxicitat reproductiva, amb una anticoncepció estricta en els assaigs clínics. Els estudis de toxicitat reproductiva de fase I/II s'han de completar abans dels assaigs clínics a gran-escala, i els estudis de toxicitat reproductiva de fase III s'han de completar abans de l'aprovació.
⑺Fototoxicitat:L'avaluació de la fototoxicitat s'ha de completar abans de la presentació de l'IND. Si l'absorpció molar és superior a 1.000 M-1cm-1, es considera que hi ha un risc de fototoxicitat i s'han de realitzar proves de fototoxicitat abans dels assaigs clínics a gran escala.
4. Com s'han de fixar les dosis en les proves de toxicologia? Com s'ha de seleccionar la dosi més alta?
Resposta:En referència als "Principis d'orientació tècnica per a les proves de toxicitat de dosis repetides de fàrmacs", "En principi, les dosis altes haurien d'induir reaccions tòxiques evidents en animals, les dosis baixes haurien de ser equivalents o superiors a la dosi efectiva en animals o ús clínic, i les dosis mitjanes s'han d'establir entre dosis altes i dosis baixes en funció del mecanisme tòxic i de la relació entre la toxicitat i la resposta entre dosis altes i baixes".
A la pràctica, tenint en compte el cost elevat de les proves de toxicologia, la realització d'una prova-de descoberta d'intervals de dosis (DRF) amb uns quants primats no-humans és el mètode més rendible-i que estalvia-la mà d'obra. La dosi per a les proves de DRF també s'hauria d'establir a partir d'estudis de seguretat preliminars realitzats durant la determinació precoç de PCC i estudis farmacològics. Moltes institucions també realitzen proves de toxicitat aguda juntament amb proves de DRF, que no són proves de-GLP, com s'esmenta a M3 (R2), seguint el principi 3R per reduir l'ús d'animals.
Per als grups de dosis baixa, mitjana i alta, generalment s'utilitza un espai de 2-3 vegades. En les proves formals de toxicologia, la situació ideal és que el grup de dosis altes pugui demostrar una toxicitat evident, i els grups de dosi baixa o mitjana es puguin utilitzar com a NOAEL.
A més, per a la selecció de la dosi més alta, M3 (R2) també proporciona respostes estàndard. En termes senzills, la dosi més alta en toxicologia hauria de ser la dosi màxima tolerada (MTD) o la dosi màxima factible (MFD, que es pot entendre com la dosi màxima que els animals poden tolerar en funció del producte i les característiques dels animals), o hauria d'aconseguir la saturació d'exposició, o el nivell d'exposició hauria de ser prou alt (arriba a 50 vegades la dosi clínica prevista). En general, 1000 mg/kg/dia es considera suficient tret que la dosi clínica prevista arribi a 1g/dia i el nivell d'exposició de 1000 mg/kg no arribi a 10 vegades el nivell d'exposició clínica, en aquest cas cal augmentar encara més la dosi fins a 10 vegades el nivell d'exposició clínica, o 2000 mg/kg/dia, o MFD.
5. Quins estudis en investigació de seguretat no clínica han de seguir BPL i quins no?
Resposta:Els estudis farmacològics i farmacocinètics no necessiten seguir BPL, mentre que els estudis de farmacologia de seguretat, genotoxicitat, toxicitat reproductiva i toxicitat a dosis repetides han de seguir BPL.
6. Quant dura la durada dels estudis no clínics de toxicitat de dosis repetides?
Resposta:Els requisits de durada per donar suport a la realització d'assaigs clínics i l'aprovació del mercat són diferents i han de ser específics per al període de dosificació dels assaigs clínics. Per exemple, per als pacients amb esclerosi múltiple, el període mínim d'assaig clínic previst és de dos anys. Per tant, quan s'inscriuen pacients amb esclerosi múltiple en assaigs clínics, es requereix un estudi de toxicitat crònica sobre rosegadors de 6-mesos i 9-mesos no-de rosegadors, que és suficient per donar suport a l'aprovació del mercat. Per als fàrmacs no-oncològics, generalment s'utilitza un estudi de toxicitat crònica de 4 setmanes per donar suport a un període de dosificació no superior a 4 setmanes per als primers assaigs clínics en humans.
7. Com triar animals d'experimentació per a l'avaluació de la seguretat no clínica?
Resposta:En general, s'utilitzen dos tipus d'animals, els rosegadors amb rates són l'opció preferida i els no-rosegadors amb gossos Beagle. Per descomptat, també s'han de seguir els principis d'anàlisi-específics del producte. Per a molècules petites, la selecció d'espècies hauria de tenir en compte principalment les característiques metabòliques del producte en recerca en animals que són similars als humans. Es pot fer referència a la "Prova d'anàlisi i identificació de metabòlits de productes d'investigació en ratolins CD-1, rates SD, gossos Beagle, micos Cynomolgus i microsomes de fetge humà", seleccionant espècies amb característiques metabòliques similars a les humanes, és a dir, espècies amb quantitats i tipus de metabòlits similars als humans. A més, l'espècie seleccionada ha de ser sensible al producte en investigació. Segons l'experiència passada, per a un fàrmac de molècules petites, les seves característiques metabòliques en gossos Beagle poden ser similars a les dels humans, però amb una exposició baixa.
