L'anàlisi del líquid cefaloraquidi (LCR) és una eina poderosa per millorar la detecció de diversos processos que es produeixen dins del sistema nerviós central, com ara sagnat, inflamació, infecció, tumors i altres afeccions clíniques. A més, les avaluacions en sèrie de compostos del LCR (com ara hormones, fàrmacs, neurotransmissors, biomarcadors, metabòlits i virus) són igualment crucials tant en la investigació bàsica com en la translacional. El volum de LCR al sistema nerviós central es manté estable mitjançant la secreció i l'absorció.
I. Consideracions operatives
El LCR normalment es recull mitjançant un ventricle cerebral o una punció lumbar. La punció lumbar comporta un risc relativament menor de complicacions en primats no-humans perquè, en la majoria de les espècies, el lloc de la punció lumbar està lluny de l'extrem de la medul·la espinal. És necessària l'anestèsia adequada i les tècniques asèptiques, inclosa la preparació del lloc com ara l'afaitat i l'ús de materials estèrils. S'han d'utilitzar almenys guants, xeringues i agulles estèrils, tenint en compte les cortines quirúrgiques estèrils. La recollida de LCR es realitza normalment en decúbit lateral, en decúbit esternal o assegut, millorant l'accés als ventricles cerebrals o ampliant l'espai intervertebral mitjançant la flexió del coll o la columna vertebral. La mida i la longitud de l'agulla escollida han de ser adequades per a l'espècie i la mida dels primats no-humans. Les tècniques, l'equip, els consumibles utilitzats durant el procediment i les cures perioperatòries varien segons l'espècie, els objectius de la investigació i les preferències del veterinari clínic.
Alguns protocols de recerca poden requerir la recollida contínua de LCR al llarg del temps o la recollida de mostres de LCR de subjectes no anestesiats. Per a aquests protocols, la recollida contínua de LCR de micos rhesus desperts es pot aconseguir mitjançant catèters de LCR implantats a llarg termini-connectats a ports de recollida subcutani.
L'autor ha fet tot el possible per trobar les últimes referències sobre el volum total de LCR, els límits o recomanacions per a les puncions durals, la freqüència de recollida, el volum de retirada segura i les taxes de reposició de LCR. La literatura sobre aquest aspecte és limitada per a la majoria dels-primats no humans. A més, els mètodes de recollida varien, ja que les enquestes de membres de l'Associació Veterinària de Primats No{{3}Humans indiquen que diverses institucions utilitzen mètodes diferents per a la recollida de LCR. Per tant, l'autor proporciona consideracions i recomanacions per a la recollida de LCR basades en la millor evidència existent.
Com a referència, estudis anteriors han determinat que el volum aparent de LCR en micos rhesus mascles adults (8,0-10,6 kg) és de 10+/-0,06 ml, amb un flux de LCR de 0.018+/-0,003 ml/min. La taxa de formació de LCR en micos rhesus oscil·la entre 28,6 i 44,2 μL/min. Es necessiten més investigacions sobre primats no humans en aquesta àrea per facilitar el desenvolupament de recomanacions més instructives.
II. Reaccions adverses potencials
Tot i que les complicacions durant la recollida de LCR en primats no-humans són rares, les variacions anatòmiques i els mètodes tècnics inadequats o inadequats poden provocar danys a la mostra o complicacions com ara sagnat, hèrnia, infecció, danys al tronc cerebral, la medul·la espinal o les arrels nervioses i molèsties als animals. Tot i que aquestes complicacions són rares, poden comprometre el benestar dels animals.
A causa dels riscos que comporta, el LCR ha de ser recollit per un veterinari o personal veterinari format. Per als intents fallits de recollida de CSF, les pràctiques poden variar. És una pràctica habitual permetre fins a tres intents infructuosos d'una persona. Després del tercer intent infructuós, una altra persona qualificada hauria de prendre el relleu. Si el segon individu no pot recollir LCR després de tres intents, els intents s'han d'aturar. Mentrestant, l'animal rebrà un tractament analgèsic adequat i es recuperarà de l'anestèsia. Canviar el lloc de recollida (per exemple, de ventricles cerebrals a lumbars) després d'intents infructuosos sovint té èxit. Si es produeix un intent fallit sense guia d'imatge, es pot utilitzar la col·locació d'agulles assistida per fluoroscòpia-. A més d'augmentar la taxa d'èxit, la guia d'imatge també pot reduir la taxa de puncions traumàtiques.
El seguiment postoperatori ha de continuar fins que l'animal torni a la seva gàbia i pugui mantenir una postura erguida sense suport. El seguiment dels animals ha de durar almenys 24 hores o segons el protocol aprovat pel Comitè Institucional de Cura i Ús d'Animals (IACUC). El seguiment ha d'incloure avaluacions dels paràmetres fisiològics, conductuals i locomotors bàsics. S'han d'avaluar especialment els signes de disfunció neurològica, que inclouen, entre d'altres, letargia, depressió, coma i signes de pressió del cap. Els mals de cap i la consegüent hipotensió intracranial després de la recollida de LCR no són estranys en medicina humana. Tenint en compte aquesta complicació potencial en primats no-humans, el tractament analgèsic s'ha de proporcionar durant la cirurgia i continuar durant 2 o 3 dies després de l'operació, o segons sigui necessari basant-se en les observacions postoperatòries relacionades amb els comportaments associats amb mal de cap o dolor espinal. El règim analgèsic més eficaç pot implicar un tractament integral iniciat preoperatori.
III. Consideracions IACUC i manteniment de registres
L'IACUC hauria d'estar familiaritzat amb els procediments relacionats amb la recollida de LCR i totes les complicacions potencials i revisar-los almenys una vegada a l'any. Tota la informació rellevant, com ara les dosis de fàrmacs, les preparacions preoperatòries, els volums de LCR recollits, la freqüència de recollida i la recuperació postoperatòria a curt - i llarg- termini, s'ha de descriure al protocol IACUC i documentar-se adequadament en els registres mèdics o els registres de laboratori.
Tot i que el CSF pot ser dades crucials en els protocols d'investigació, les tècniques de recollida inadequades poden afectar el benestar animal. A l'hora de presentar els protocols, s'ha de proporcionar una justificació científica del nombre i la freqüència de les col·leccions. Concretament, l'IACUC hauria d'avaluar acuradament cada proposta que impliqui la recollida de LCR i considerar el següent:
1.La recollida de LCR és essencial per assolir els objectius científics assenyalats en el protocol?
2. Hi ha mètodes alternatius i mètodes d'avaluació del sistema nerviós central menys invasius (com les tècniques d'imatge) disponibles i, si és així, s'han considerat?
3. Els operadors han rebut la formació adequada i tenen les habilitats suficients?
4. Es proporcionarà anestèsia perioperatòria i règims analgèsics adequats? S'ha de consultar amb veterinaris d'animals de laboratori sobre els plans d'anestèsia i analgèsic.
5.El volum de LCR recollit té en compte l'edat i la mida de l'animal?
6.El nombre i la freqüència de les puncions durals són adequats per a l'animal i s'ha minimitzat el risc de complicacions? Si formen part de l'estudi diverses col·leccions de LCR, s'han d'especificar els temps màxims de recollida per a cada animal.
7.El pla de seguiment postoperatori és adequat?
8.S'han considerat totes les possibles complicacions postoperatòries i s'han enumerat totes les intervencions raonables, inclosa l'eutanàsia?
